Twist Bioscience Corporation publicó sobre el descubrimiento exitoso de anticuerpos VHH derivados de alpacas utilizando un flujo de trabajo de descubrimiento in vivo disruptivo y de función avanzada desarrollado por Abveris, también conocido como Twist Boston, en la plataforma optofluídica Beacon. Un anticuerpo de dominio único VHH es el dominio de unión al antígeno de anticuerpos únicos de cadena pesada generados en camélidos como las llamas y las alpacas. La mayoría de los anticuerpos contienen dos dominios variables, las cadenas pesada y ligera; sin embargo, los camélidos fabrican anticuerpos que contienen sólo una cadena pesada, de la que deriva el dominio único VHH.

El pequeño tamaño de los anticuerpos de dominio único VHH les permite acceder a dianas a las que los anticuerpos tradicionales no pueden llegar, con afinidades de unión estrechas y alta especificidad. Además, la ausencia de una cadena ligera emparejada en los anticuerpos de dominio único VHH simplifica la ingeniería posterior, acelerando los plazos de desarrollo. En este estudio de prueba de concepto, se utilizaron métodos personalizados de enriquecimiento, cultivo, detección y secuenciación para cribar células B individuales directamente de alpacas inmunizadas para la especificidad de la diana y la secreción de anticuerpos de cadena pesada única de alpacas inmunizadas con dos dianas diferentes, el antígeno de membrana específico de la próstata humana (PSMA) o una segunda diana ciega.

Se identificaron, exportaron y secuenciaron las células B secretoras de anticuerpos de cadena pesada-solamente específicos de la diana. Los VHH específicos de PSMA se expresaron recombinantemente como VHH-Fc, se purificaron y se caracterizaron mediante técnicas sin etiqueta. Todos los VHH-Fc excepto uno se unieron al PSMA con una afinidad nanomolar de un solo dígito.

Cuatro candidatos a VHH se humanizaron con éxito in silico utilizando un enfoque de humanización rápida en masa potenciado por el aprendizaje automático. También se realizó la secuenciación del repertorio de próxima generación de PBMC cosechadas en puntos temporales longitudinales a lo largo de la inmunización. Esto descubrió variantes adicionales dentro de los linajes clonales de los éxitos validados, algunos de los cuales podrían exhibir potencialmente propiedades farmacológicas superiores.

Esta combinación única de secuenciación de repertorios y cribado de linfocitos B únicos con función adelantada podría utilizarse para la optimización de anticuerpos aprovechando la plataforma de diseño de bibliotecas de Twist para generar bibliotecas de dominios únicos VHH con sesgo antigénico con el fin de descubrir variantes superiores. Además, la validación funcional de estos candidatos principales optimizados podría permitir el desarrollo posterior de anticuerpos de dominio único VHH específicos de PSMA de alta calidad con fines terapéuticos o diagnósticos.